單核細胞活化反應測定試驗(MAT)系利用單核細胞或單核細胞系模擬人體,以細菌內毒素標準品為基準,檢測并比較由標準品與供試品分別作用于單核細胞或單核細胞系所產生的活化反應,以釋放的促炎癥細胞因子(如IL-6、IL-1β、TNF-α)量來評價供試品中熱原污染情況,從細菌內毒素標準量效曲線得出的內毒素濃度可等效于熱原污染物濃度。
單核細胞活化反應測定試驗(MAT)可檢測的熱原包含內毒素和非內毒素的熱原,包括引起人發熱的細菌、病毒、真菌等。
本法不適用于本身能刺激或抑制單核細胞促炎癥因子的釋放以及對細胞增殖有明顯影響的供試品。
本法操作過程應防止微生物和熱原的污染。
性能特點:
1、屬于體外熱原檢測,是家兔體內熱原檢測的替代品,不使用實驗動物,符合3R原則;
2、對比家兔熱原檢測,MAT法更省時、更準確、更經濟;
3、可以檢測內毒素和非內毒素熱原(NEPs);
4、靈敏度高,重復性好,應用靈活性更高;
5、生物制品內毒素檢測遇到低內毒素回收(LER)問題時,可以用MAT熱原檢測替代內毒素檢測;
試劑盒組分與儲存條件
細胞
組分名稱 | 產品號 | 規格 | 數量 | 儲存條件 |
細胞 | MAT001 | 1 mL/支 | 2 | 低于-150 ℃保存; -80 ℃可用于短暫保存 |
MAT盒組成部分
組分名稱 | 產品號 | 規格 | 數量 | 儲存條件 |
96孔細胞培養板 | MAT002 | - | 1 | 2–8 °C |
RPMI-1640 | MAT003 | 50 mL/瓶 | 1 | 2–8 °C |
IL-6 微孔板 | MAT004 | 8孔*12條 | 1 | 2–8 °C |
30×濃縮生物素化抗體 | MAT005 | 400 μL/管 | 1 | 2–8 °C |
生物素化抗體稀釋液 | MAT006 | 16 mL/瓶 | 1 | 2–8 °C |
30×濃縮酶結合物 | MAT007 | 400 μL/管 | 1 | 2–8 °C |
酶結合物稀釋液 | MAT008 | 16 mL/瓶 | 1 | 2–8 °C |
20×濃縮洗滌液 | MAT009 | 50 mL/瓶 | 1 | 2–8 °C |
顯色底物(TMB) | MAT010 | 12 mL/瓶 | 1 | 2–8 °C |
反應終止液 | MAT011 | 12 mL/瓶 | 1 | 2–8 °C |
封板膠紙 | MAT012 | 6 張 | 1 | 2–8 °C |
MAT標準品
組分名稱 | 產品號 | 規格 | 數量 | 儲存條件 |
細菌內毒素國家標準品(單核細胞活化反應測定用) | MAT013 | 150 EU/支 | 1 | -20 ℃ |
應用場景
生物制藥:疫苗、抗體、基因治療產品的放行檢測。
醫療器械:植入物、透析液等熱原風險監控。
研發階段:快速篩選配方或包材的相容性。
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